Plasma biomarkerid enneaegse sünnituse hiiremudelis | laste uuringud

Plasma biomarkerid enneaegse sünnituse hiiremudelis | laste uuringud

Anonim

Abstraktne

Enneaegset sünnitust (PTL) seostatakse sageli põletikuga. Hüpoteesime, et raseduse ajal kasutatavad biomarkerid suudavad tuvastada rasedusi, mis on PTL-i tekke kõige ohtlikumad. Kasutati põletikust põhjustatud PTL hiiremudelit. Pinna tugevdatud laseri desorptsiooni / ionisatsiooni lennuaja massispektromeetriat kasutati, et analüüsida ja võrrelda plasmavalgu (PP) profiili CD-1 hiirte vahel, kellele emakasiseselt süstiti kas lipopolüsahhariidi (LPS) või PBS-i tiinuse d 14.5 ajal. Normeeritud PP piikide mediaanerinevused kahe rühma vahel määrati Mann-Whitney U testi ja valede avastamise määra abil. Teises katseseerias süstiti mõlemale hiirte rühmale väiksemat LPS-i annust. Kokku tuvastati 1665 piiki. Kolmkümmend piiki ekspresseerusid rühmade vahel väga erinevalt ( p <0, 0001). MALDI-TOF / TOF-MS abil tuvastati kaks 11 kDa valgupiiki ja kinnitati, et need on hiire seerumi amüloid A (SAA) 1 ja 2. Plasma SAA2 tase tõusis LPS-iga ravitud loomadel, võrreldes kontrollidega ja LPS-iga ravitud loomadega, kes edastas enne tähtaega võrreldes tähtajaga edastusega. SAA2-l on potentsiaal olla plasma biomarkeriks, mis suudab tuvastada rasedusi, kellel on oht PTL-i tekkeks.

Peamine

Enneaegne sünd on vastsündinute haigestumuse ja suremuse kõige olulisem põhjus Ameerika Ühendriikides (1–3). Hoolimata mitmetest sekkumistest, sealhulgas mitmesuguste tokolüütikumide, antibiootikumide kasutamisest ja emaka kokkutõmbumiste jälgimisest, ei ole enneaegse sünnituse esinemissagedus USA-s viimase paarikümne aasta jooksul vähenenud ja on praegu 12, 7% (4, 5) (sündid. 2005. aasta esialgsed andmed). //www.cdc.gov/nchs/). Viimasel ajal on progesterooni kasutamine osutunud tõhusaks enneaegse sünnituse (PTL) ennetamisel valitud naiste rühmas. Selle toimimise mehhanism pole siiski veel teada (6, 7). Üks probleemidest PTL-i ennetamisel on meie võimetus täpselt tuvastada, millised rasedused on PTL-i kõige tõenäolisemalt keerulised (8). Biomarkeri tuvastamine raseduse ajal võib aidata tuvastada rasedate riskirühma, kus konkreetset ravi saab uurida. Samuti võib see aidata meil saada olulisi teadmisi PTL-i põhjustavate molekulaarsete radade kohta.

On kindlaid tõendeid, mis näitavad, et emakasisene (RÜ) nakkus või põletik on tihedalt seotud enneaegse sünnitusega (3, 9–11). Arvatakse, et spontaansest PTL-ist põhjustatud 25–75% -l sündidest on ilmne või subkliiniline RÜ-i põletik (12, 13). RÜ põletiku tekkimise aeg ja see, kas need põletiku markerid on plasmas, pole teada. Raseduse varajases staadiumis tuvastatud tundlik diagnostiline marker võib aidata ennetava ravi rakendamisel varasematele naistele, kellel on risk PTL-i tekkeks.

Pinnaga täiustatud laserdesorptsiooni / ionisatsiooni lennuaja massispektromeetria (SELDI-TOF / MS) on suure läbilaskevõimega proteoomikatehnoloogia, mida on kasutatud haiguste võimalike biomarkerite avastamiseks (14–22).

Selles uuringus kasutasime põletikust põhjustatud PTL-i hiiremudelit potentsiaalsete biomarkerite avastamiseks, mis ekspresseeruvad diferentseeritult enneaegse sünnituse saanud hiirte ja nende vahel, kes sünnitasid hilisemal ajal.

MATERJALID JA MEETODID

Loomad.

CD-1 hiired, 8–10 nädalat vanad, osteti firmast Charles River (Wilmington, MA). Kõik loomade protokollid viidi läbi vastavalt Stanfordi ülikooli loomahoolduse ja kasutamise komitee juhistele.

1. katse.

RÜ põletiku esilekutsumiseks kasutati fenooliekstraktsiooni teel puhastatud Escherichia coli 0111: B4 lipopolüsahhariidi (LPS) (L2630, Sigma-Aldrich Chemical Co., St. Louis, MO). Tiinuse d 14.5 ajal tehti pärast Avertiniga tuimastamist mini-laparotoomia (240 mg / kg kehakaalu kohta). LPS (25 μg) ( n = 10), mis oli suspendeeritud 100 μl PBS-is, süstiti emaka parema sarve kahe esimese raseduspaki vahele, kasutades Elovitzi jt kirjeldatud meetodit . (23). Kontrollloomad ( n = 10) said 100 ui steriilset PBS-i. Pärast emaka tagastamist kõhupiirkonda suleti fasts ja nahk. Seda meetodit kasutades paranesid loomad hästi, ilma haigusnähtudeta.

2. katse.

Teises katseseerias süstiti kõigile loomadele väiksemat LPS-i annust. Kakskümmend mikrogrammi LPS-i, mis oli suspendeeritud 100 μl PBS-is, süstiti parema emaka sarve kahe esimese raseduspaki vahele tiinuse d 14.5. Süstiti 13 looma.

Plasmakogu.

Vereproovid koguti infraorbitaalse punktsiooni teel EDTA-ga kaetud mikrotainerisse (BD, Franklin Lakes, NJ) ja tsentrifuugiti kiirusel 5000 x g 10 minutit 4 ° C juures. Plasma eemaldati, jaotati alikvootideks ja hoiti kuni analüüsimiseni temperatuuril -80 ° C.

SELDI-TOF MS.

Proteomika profileerimiseks kasutatavat SELDI-TOF / MS protokolli on varem kirjeldatud (24). Plasmat (20 μL) eeltöödeldi U9 lahusega (9 M uurea / 2% CHAPS / 50 mM Tris, pH 9; 30 μL) ja kanti tugevale anioonvahetusgraanulile pH 9 juures (Q-keraamiline HyperD F, Pall Life Sciences, Ann Arbor, MI) 96-augulises Silent Screen filtrimisplaadil (NUNC, Rochester, NY). Seejärel pesti prooviga täidetud anioonvahetuskerakesi järjestikku puhvritega (kummaski 200 μl) pH 9, 7, 5, 4 ja 3 ning lõpuks 33, 3% isopropanooli / 16, 7% atsetonitriili (ACN) / 50% H20-ga. /0, 2% trifluoroäädikhape (TFA). Ülaltoodud fraktsioonide eluaatide alikvoodid (igaüks 10 μl) suspendeeriti sobivates sidumispuhvrites ja kanti ProteinChip SELDI massiividele: CM10, nõrk katioonivahetuspind ja H50, pöördfaasiline pind (Bio-Rad Laboratories, Hercules, CA). Sidumispuhvrid olid 0, 1 M naatriumatsetaatpuhver (pH 4) CM10 massiivide jaoks ja 10% ACN / 0, 1% TFA H50 massiivide jaoks. Pärast pesemist ja õhu käes kuivatamist kanti massiividele sinapiinhape.

Fraktsioneeritud proovide massispektrite saamiseks loeti ProteinChip massiive Bio-Rad PCS4000 massispektromeetriga. Massispektrid saadi kolme laseri intensiivsusega: madal (3500 nJ), keskmine (4800 nJ) ja kõrge (7250 nJ), kasutades instrumendi parameetreid, mis olid optimeeritud väikeste, keskmiste ja suurte valkude jaoks. Iga proovi jaoks genereeriti kokku 60 spektrit (viis fraktsiooni kahes tüüpi massiivides kolme erineva lasertugevusega, mis tehti kahes eksemplaris). Spektrid kalibreeriti väliselt, kasutades valgustandardite segu spektrit vahemikus 7–30 kDa (Protein Standards II, Bio-Rad).

Statistiline analüüs.

Kõik massispektrid normaliseeriti ioonide koguvoolu abil. Maksimaalse valiku aluseks oli m / z ja signaali intensiivsus, kasutades ProteinChip Data Manager tarkvara 3.0.7, Enterprise Edition (Bio-Rad). Kombineeriti iga dubleeritud spektri iga piigi keskmine intensiivsus.

Mann-Whitney U testi kasutati PBS-iga süstitud kontrollrühma ja LPS-iga süstitud uuringugruppide vahel vahet eristavate piikide tuvastamiseks. Mitme hüpoteesi testimise kontrollimiseks kasutati permutatsioonil põhinevat meetodit valede avastamise määra (FDR) hindamiseks (25, 26). Kui kõigi piikide olulisuse hindamiseks rakendati algsesse andmekogumisse antud p väärtuse läve, saadi tõestest ja valepositiivsetest positiivsete diferentsiaalpiikide koguarv. Sama p väärtuse lävi, kui seda rakendati kõigile 100 permuteeritud andmekogumile, andis 100 erinevat arvu positiivseid diferentsiaalpiike.

FDR-i hindamiseks kasutati valepositiivsete suhete suhteid, sealhulgas 100 erineva valepositiivsuse ja positiivsete üldarvu keskmise, mediaani ja 95% -lise jaotuse ning positiivsete üldarvu vahel. Pärast FDR üldist hindamist arvutati kohalik FDR ja seda kasutati täiendava juhisena optimeeritud p- väärtuse läve valimiseks ja selle üle, kas tipphetki väljendati tõesti diferentsiaalselt (27, 28). Sama meetodit kasutati katse 2 spektrite jaoks.

Biomarkerite puhastamine ja identifitseerimine.

Kolm 11 kDa valgupiiki, mis olid PBS- ja LPS-rühmade vahel oluliselt erinevad, puhastati edasi. Kasutati 20 mikroliitrit plasma LPS-iga süstitud hiirtelt. Alguses kasutati rikkaliku albumiini eemaldamiseks plasmas ProteomeLab IgY-HSA SC valgu eralduskomplekti (Beckman Coulter, Fullerton, CA). Läbivool (500 ui) kontsentreeriti tsentrifugaalfiltrimooduliga Microcon YM-3 (Millipore, Billerica, MA) mahuni 100 uL. Fraktsioon anioonivahetuskromatograafia abil viidi läbi nagu eelnevalt kirjeldatud (SELDI-TOF / MS). Kontsentreeritud voolu läbi pesti järjestikku puhvritega (igaüks 500 μl) pH 7, 5, 4 ja orgaanilise puhvriga. Iga elueerimine tuvastati CM10 kiibil SELDI-TOF / MS abil.

Edasine puhastamine hüdrofoobse fraktsioneerimise abil viidi läbi järgmiselt. Fraktsioonid 3 ja 4, mis sisaldasid huvipakkuvaid valgupiike, seoti pöördfaasi helmestega (polüstüreen / divinüülbenseen PLRP-S helmed, Polymer Laboratories, Amherst, MA) 30 minutit toatemperatuuril. Helmeid tsentrifuugiti ja pärast tsentrifuugimist koguti supernatant. Valkudega seotud helmeid pesti lahustega, mis sisaldasid kasvavat protsenti ACN-i (10, 20, 30, 40, 50, 60 ja 70%) 0, 1% TFA-s. Iga hüdrofoobne fraktsioon koguti ja analüüsiti NP20 massiivil, et leida fraktsioonid, mis sisaldasid biomarkeri piike.

Biomarkerid identifitseeriti 1-D SDS PAGE ja MALDI-TOF / TOF-MS abil (Applied Biosystems 4700, Foster City, CA). Huvipakkuvaid valgupiike sisaldavad hüdrofoobsed fraktsioonid kuivatati ja resuspendeeriti SDS-PAGE proovipuhvris ja töötati NuPAGE Bis-Tris geelil (4–12%; Invitrogen, Carlsbad, CA). Geeli värviti Coomassie Blue (SimplyBlue, Invitrogen) seguga, millele järgnes värvimine öö läbi temperatuuril 4 ° C. Ligikaudu 11 kDa ribad lõigati välja. Valk ekstraheeriti osadest geelitükkidest, kasutades 10 μl elueerimispuhvrit (50% sipelghapet, 25% ACN, 15% 2-propanooli ja 10% vett) ja biomarkeri piike sisaldavad ribad tuvastati massispektrite saamiseks geeli ribaekstraktide osa NP20 ProteinChip massiivides.

Iga geelitükk, mis sisaldas biomarkeri piiki, redutseeriti DTT-ga, alküüliti jodoatseetamiidiga ja digereeriti 100 ng trüpsiiniga. Trüpsiini digereeriti täpid MALDI sihtplaatidele ja analüüsiti MALDI-TOF / TOF MS abil. Järjestuste andmete saamiseks analüüsiti MS / MS abil 10 kõige arvukamat iooni, mis ei vastanud teadaolevatele trüpsiini autolüütiliste toodete massidele. Maskotti otsimootorit kasutati valkude tuvastamiseks NCBI andmebaasist otsimiseks.

ELISA test.

Seerumi amüloidi A (SAA) 2 taset hiire plasmas mõõdeti hiire SAA2 spetsiifilise ELISA komplekti abil (Life Diagnostics Inc. West Chester, PA). Standardid ja proovid testiti kahes eksemplaris.

TULEMUSED

1. katse.

Enne SELDI-TOF / MS proovide võtmist läbiviidud esialgse annuse-vastuse seerias andis RÜ 25 μg LPS süstimise tulemusel PTL-i 10-l 11-st süstitud hiirest. Seda annust kasutati hiljem uuringus 1. katses. Kõigi hiirte plasmast võeti proov 15 tundi pärast LPS ( n = 10) või PBS-i süstimist ( n = 10) ja töödeldi MS jaoks, et leida LPS-i indutseeritud enneaegsusega seotud biomarkereid. Piigid saadi pärast massikalibreerimist, lähtetaseme lahutamist ja normaliseerimist, kasutades ProteinChip Data Manager Software 3.0.7, Enterprise Edition, rühmitamise ja joondamise funktsiooni. Kokku hinnati Mann-Whitney U testi abil 1665 piiki. Nendest piikidest olid 222 oluliselt erinevad p <0, 01, 100 p <0, 001 ja 30 p <0, 0001 juures (andmeid pole näidatud).

Üks meetod teostatavate statistiliste testide arvu kontrollimiseks (mitme hüpoteesi testimise probleem) on nende andmete FDR-i uurimine. Globaalse FDR arvutamiseks erinevate Mann-Whitney p väärtuse künniste ja valgu-spetsiifiliste lokaalsete FDR-i analüüsi tööriista (//translationalmedicine.stanford.edu/Mass-Conductor/FDR.html, Ling, avaldamata andmed) abil arvutati globaalne FDR FDR (27, 28). Range läve valimiseks kasutati p- väärtuse läve valimisel kohalikku FDR-i 0, 005, mis viis Mann-Whitney p- väärtuseni 0, 0001. Sellel künnisel on ülemaailmne FDR kontrollitud alla 0, 1%. Kokkuvõtlikult võib öelda, et Mann-Whitney p väärtuse 0, 0001 valimine optimeeritud p väärtuse läviks, juhindudes nii globaalsest kui ka lokaalsest FDR-analüüsist, andis edasiseks iseloomustamiseks kokku 30 väga erinevalt väljendatud piiki.

2. katse.

Katse 2 eesmärk oli süstida kõik hiired LPS-i pisut madalama kontsentratsiooniga, kontsentratsioon, mis ei põhjusta enneaegset sündi kõikidele hiirtele. LPS madalama kontsentratsiooniga 13 hiire süstimisel saadi seitse hiirt, kes sünnitasid tähtajaliselt, ja kuus hiirt, kes sünnitasid enneaegselt. Plasmaproovide analüüsimisel tuvastati kokku 1718 piiki. Seal oli 128 piiki p väärtusega <0, 01 ja FDR <0, 1 (andmeid pole näidatud).

Mõlemas katses olid kõige erinevamad piigid rühmas m / z 11 600–11 800, mida leidus anioonivahetusega töödeldud plasmaproovide fraktsioonides 3 ja 4. Katsete 1 (tabel 1) ja 2 (tabel 2) FDR tulemuste, p väärtuste, ROC ja spektrite põhjal tehti kolm biomarkeri piiki, mille m / z oli umbes 11 640, 11 720 ja 11 780 (joonis 1). täiendavalt puhastati ja identifitseeriti.

Täissuuruses tabel

Täissuuruses tabel

Image

Esindatud SELDI spektrid plasmast. ( A ) 1. eksperimendi CM10 kiibidel m / z 11 600–11 800 piikide rühm. Kuvatakse kolm piiki 11, 63 (*), 11, 72 (**) ja 11, 78 (§) kDa. Plasma spektrid hiirtelt, kellele süstiti 25 μg LPS ( kindel joon ) või PBS ( punktiir ). ( B ) Rühma piikidega m / z 11 600–11 800 CM10 kiipidel eksperimendist 2. Plasma spektrid hiirtelt, kellele süstiti 20 μg LPS-i, mis andsid enneaegset ( pidev joon ) või terminit ( punktiirjoont ).

Täissuuruses pilt

Biomarkeri identifitseerimine.

Pärast albumiini kahanemist fraktsioneeriti hiire plasma anioonivahetuskromatograafiaga sarnaselt avastusfaasis kasutatavale. Anioonivahetuskerakestest fraktsioonis 4 elueerunud materjal (ekstraheerimine pH 4ga, millele järgnes ekstraheerimine pH 5-ga) fraktsioneeriti täiendavalt pöördfaasi kromatograafia abil. Materjal, mis elueerus 40% ACN-ga, kuivatati, lahustati SDS-PAGE puhvris ja eraldati SDS-PAGE abil. Nagu on näidatud joonisel 2 C , leiti SDS-PAGE ribad A ja B umbes 11 kDa juures, mis oli lähedane SELDI tuvastatud m / z 11 600–11 800 biomarkerile. Mõlemast ribast A ja B ekstraheeritud valk kinnitati SELDI abil NP20 kiibi abil. Joonised fig 2 A , B , D ja E näitavad puhastamise käigus saadud massispektrit. Bipist A (joonis 2D) tuvastati piik massiga 11 899 ja ribalt B tuvastati kaks piiki 11 792 ja 11 875 (joonis 2 E ). Nende ribade muud osad lagundati trüpsiiniga ja saadud materjali analüüsiti MALDI-MS / MS abil. Järjestuse analüüs näitas, et iga 11 kDa riba sisaldas hiire SAA1 ja 2 segu, nagu on näidatud joonisel 2 F ja G. Kahe SAA isovormi olemasolu igas ribas näitab SAA1-st tuletatud peptiidide mass massiga 1130, 50 ja 1455, 62 (näidatud kastides joonistel 2 F ja G ) ja peptiidide massidega 1146, 50 ja 1487, 73 (rõhutatud joonisel 2 F). ja G ) mõlema riba MS spektrites.

Image

Biomarkerite SAA1 ja SAA2 identifitseerimine. ( A - E ) biomarkeri SELDI-TOF spektrid puhastamise ajal. ( A ) CM10 massiivi fraktsioonis 4 olevate biomarkerite spekter. Piikide mass ( m / z ) on 11 616, 92 (*), 11 713, 20 (**) ja 11 765, 86 (§). ( B ) 4. fraktsiooni pöördfaasi graanulite 40% ACN fraktsiooni spekter. Piikide mass ( m / z ) on 11 712, 43 (*) ja 11 808, 95 (**). ( C ) SDS-PAGE abil eraldatud valkude sisaldus 40% ACN fraktsioonis. Biomarkerid (ribad A ja B) asuvad 11 kDa lähedal. ( D ja E ) 11 kDa ribadest (ribad A ja B) ekstraheeritud valkude spektrid vastavalt 40% ACN fraktsiooni SDS-PAGE järgi. Piikide mass ( m / z ) on D-s 11, 898, 66 (*) ja R-s 11 792, 35 (*) ja 11 875, 25 (**). ( F ja G ) ribadest A ja B. ekstraheeritud trüpsiiniga lagundatud valkude järjestuse analüüs. Lahtritega tähistatud piigid on toodud SAA1-st saadud peptiidide jaoks ja alla joonitud piigid on SAA2-st saadud peptiidid.

Täissuuruses pilt

Hiire SAA1 mass on 11 754 ja hiire SAA2 mass 11 605. SDS-PAGE-st ekstraheeritud piikide massides m / z on nihe nii biomarkerite m / z -st enne SDS-PAGE-d kui ka peptiidide valkude arvutatud mass, mis on tuvastatud SDS-PAGE geeli ribades. See nihe on tõenäoliselt tingitud valkude modifikatsioonide kombinatsioonist, mis toimub SDS-PAGE ajal ( nt alküülimine akrüülamiidiga lisab massile 71) ja valkude ekstraheerimisega SDS-PAGE geeli ribadest ( nt mitu formüülimisreaktsiooni, millest igaüks lisab 28 massi juurde) (29, 30).

ELISA.

1. katses tõusis LPS-iga ravitud loomadel SAA2 keskmine ja keskmine plasma tase vastavalt 40 ja 10 korda, võrreldes PBS-i kontrolliga (tabel 3). Eksperimendis 2 olid keskmine ja keskmine SAA2 tase enneaegse sünnituse saanud hiirtel 2 korda kõrgem kui neil, kes said sünnituse ajal (tabel 4).

Täissuuruses tabel

Täissuuruses tabel

ARUTELU

Esimeses uuringute seerias leidsime mitu biomarkerit, mis olid märkimisväärselt erinevad kontroll-hiirte vahel, kes olid sünnitanud, ja LPS-iga töödeldud hiirte vahel, kellel tekkis PTL. Teises uuringute seerias, kus hiirtele süstiti väiksemat LPS-i annust, arenes osadel välja PTL, samas kui teistele süstiti sama annus, mis manustati tähtajaliselt. Nende kahe rühma biomarkerite profiilides oli mitu erinevust. Kahest biomarkerist, mis erinesid varasema ja enneaegse sünnituse saanud loomade vahel, tuvastasime kaks 11 kDa suurust biomarkerit SAA1 ja SAA2.

SAA on tuvastatud plasma biomarkerina mitmes haigusseisundis, sealhulgas eesnäärme- ja munasarjavähis (31–33). ELISA-ga tehtud kvantitatiivne analüüs näitas, et SAA2 sisaldus oli suurem loomadel, kellel arenes mõlemas rühmas PTL vs. termiline sünnitus, kinnitades selles mudelis SAA rolli PTL-i kujunemisel. Vaatamata selle uuringu väikesele valimi suurusele on tulemused intrigeerivad.

SAA perekond sisaldab mitmeid valke molekulmassiga vahemikus 11 kuni 12 kDa (34). SAA on ägeda faasi reagent, mis tekib peamiselt maksas, aga ka leukotsüütides ja teistes organites (35). Suuri koguseid on põletikulistes häiretes nagu reumatoidartriit, ateroskleroos ja mitmesugused pahaloomulised haigused (36–38). Samuti on näidatud, et see esineb inimese esimese trimestri trofoblastides (39).

On püstitatud hüpotees, et PTL-i korral nakatumise või põletiku tagajärjel vabanevad põletikulised tsütokiinid, mis stimuleerivad maatriksmetalloproteaase (MMP-sid) ja prostaglandiinide sünteesi, põhjustades emaka kokkutõmbeid (40, 41). SAA geeni ekspressiooni reguleerimine toimub transkriptsiooni tasemel. Kuigi SAA ekspressiooni saab erinevates tingimustes aktiveerida erinevatel radadel ja transkriptsioonifaktoritel, indutseerivad SAA geeni ekspressiooni põletikus mitmesugused põletikuvastased tsütokiinid (42). SAA võib omakorda kutsuda esile leukotsüütide kaudu tsütokiinide sekretsiooni ja stimuleerida leukotsüütide ligitõmbamist põletikualadel, suurendades sellega tsüklit (43, 44). SAA indutseerib ka MMP-sid, rakuvälist maatriksit lagundavaid ensüüme (45), mis on emakakaela küpsemise põhietapp sünnituse ajal.

LPS, gramnegatiivsete bakterite välisseina põhikomponent, toimib seondumisel adaptervalkudega, mis võimaldavad seostumist teemaksulaadse retseptor-4-ga (46). Selle tulemuseks on NF-κB aktiveerimisele viiva raja aktiveerimine ja mitmesuguste põletikuelsete tsütokiinide ülesreguleerimine. Need tsütokiinid stimuleerivad SAA tootmist, suurendades veelgi põletikulist kaskaadi, põhjustades lõpuks enneaegseid emaka kokkutõmbeid.

Hüpotees on, et SAA mängib olulist rolli põletikust põhjustatud PTL patogeneesis ja võib olla raseduse alguses põletikust põhjustatud PTL biomarker. On näidatud, et preeklampsiaga rasedatel suureneb SAA tase kontrollrühmaga võrreldes (47). Ehkki kasutatud loommudel ei olnud PTL-iga seotud seisundite preeklampsia või RÜ kasvupeetuse uurimiseks optimaalne, on huvitav spekuleerida, kas SAA võib olla marker muudele sünnitusabilistele komplikatsioonidele, mis põhjustavad enneaegset sünnitust. Hiire ja inimese raseduse loomupäraste erinevuste tõttu on nende leidude ekstrapoleerimine voodikohale keeruline. Nende leidude kliinilise olulisuse kindlakstegemiseks tuleb läbi viia täiendavad uuringud nii loommudelites kui ka inimestel.

Sõnastik

ACN

atsetonitriil

FDR

vale avastamise määr

emakasisene

LPS

lipopolüsahhariid

MW

Mann-Whitney

PTL

enneaegne sünnitus

SAA

seerumi amüloid A

SELDI-TOF / MS

pinnaga suurendatud laseri desorptsiooni / ionisatsiooni lennuaja massispektromeetria

TFA

trifluoroäädikhape