Apolipoproteiini e genotüüp ja tulemus hüpoksilis-isheemilise entsefalopaatiaga imikutel | laste uuringud

Apolipoproteiini e genotüüp ja tulemus hüpoksilis-isheemilise entsefalopaatiaga imikutel | laste uuringud

Anonim

Õppeained

  • Haiguste geneetika
  • Hüpoksiline - isheemiline entsefalopaatia
  • Pediaatria

Abstraktne

Taust:

Apolipoproteiin E (APOE) geeni alleelide e4 ja e2 täiskasvanutel on pärast ajukahjustust suur halva neuroloogilise tulemuse oht. E4 alleeli on seostatud tserebraalparalüüsiga ja e2 alleeli on seostatud kaasasündinud südamehaigusega halvema neuroloogilise tulemusega. See uuring viidi läbi hüpoteesi kontrollimiseks, et APOE genotüüp on seotud tulemusega vastsündinutel, kes jäävad ellu pärast hüpoksilist - isheemilist entsefalopaatiat (HIE).

Meetodid:

Viisime läbi kohordiuuringu HIE-st üle elanud imikute kohta, kellel oli 18–22-moelised standardiseeritud neuro-arengu hindamised, et hinnata seoseid puude ja APOE genotüüpide e3 / e3, e4 / - ja e2 / - vahel.

Tulemused:

Kokku genotüpiseeriti 139 ellujäänut. Neist 86 (62%) olid e3 / e3, 41 (29%) olid e4 / - ja 14 (10%) olid e2 / - genotüüpidest. Sada kakskümmend üheksa imikut olid genotüübi ja jälgimisandmetega; 26% -l oli mõõdukas või raske puue. Puude levimus oli e3 / e3 genotüübiga ja ilma nendeta 30% ja 19%, e2 alleeliga ja ilma selleta 25% ja 26% ning e4 alleeliga ja ilma selleta vastavalt 18 ja 29%. Ükski erinevus ei olnud statistiliselt oluline. CP levimus oli sarnane ka genotüüpide rühmas.

Järeldus:

Selles HIE ellujäänute kohordis ei olnud puue APOE genotüübiga seotud.

Peamine

Vastsündinute hüpoksiline-isheemiline entsefalopaatia (HIE) hõlmab keerulisi energiakaotuse, põletiku, nekroosi, apoptoosi ja ühenduse muutumise protsesse pärast vigastusi (1, 2, 3, 4). Terapeutilise hüpotermia kliinilised uuringud on järjekindlalt näidanud surma või kahjustuse riski vähenemist; Kliinilistes uuringutes on kahjustuste esinemissagedus ellujäänud jahutatud imikute seas olnud vahemikus 40–50% (5). Geneetiliste variantide ja kahjulike tulemuste ohu seoste paljastamine pärast hüpoksilis-isheemilist vigastust võib viia mehhanismide tuvastamiseni, mida saaks tulemuste edasiseks parandamiseks suunata.

Apolipoproteiin E (APOE) on peamine ajus toodetav apolipoproteiin (6). APOE geeni kolm alleelivarianti, e2, e3 ja e4, mis tulenevad kahest ühe nukleotiidi polümorfismist - rs429358 (tümiin, T või tsütosiin, C) ja rs7412 (C või T) - põhjustavad ühe aminohappe muutusi APOE valk (7, 8, 9). APOE e4 alleeli olemasolu on täiskasvanute seas tugevalt seostatud Alzheimeri tõve suurenenud riski ja kehva neuroloogilise tulemusega pärast traumaatilist ajukahjustust ja aju hemorraagiat (9, 10, 11). E4 alleeli on seostatud ka kognitiivse languse püsimisega täiskasvanud patsientidel pärast südame šunteerimisoperatsiooni (12).

Varasemad haigusjuhtumite kontrolli uuringud tserebraalparalüüsiga (CP), haigestumusega, mis aeg-ajalt järgneb HIE-le, on näidanud seoseid APOE e4 alleeli ning CP, mikrotsefaalia ja krampide suurenenud raskuse vahel (13, 14). Need uuringud hõlmasid nii termodünaamilisi kui ka enneaegseid imikuid, kellel olid erinevad CP vormid. Uuringutes, kus hinnati APOE genotüüpi ja tulemust trauma- ja südameoperatsioonidega laste seas, on e4 alleeli seostatud CP-ga ja halvema neurodevelopmental tulemusega (15). E2 alleeli on seostatud kaasasündinud südamehaigusega imikute seas suurenenud CP-riski, halvema neurodepressiooni tulemuse ja käitumisprobleemidega (16, 17). APOE e3 on kõige levinum alleel ja homosügootsed e3 / e3 täiskasvanud on pärast kardiopulmonaalset elustamist suurema tõenäosusega elus ja neil on parem funktsionaalne tulemus, võrreldes täiskasvanutega, kellel on vähem levinud alaeelised e4 ja e2 (18, 19).

Üheski uuringus pole andmeid selle kohta, kas keskmise raskusega kuni raske vastsündinu HIE-ga neuroloogilisi tulemusi, sealhulgas CP-d, kes elavad tühjenemiseni, seostatakse APOE geeni tavaliste variantidega, mis on seotud neuropatoloogiaga täiskasvanutel ja CP noorematel patsientidel. APOE alleelide ja vigastustejärgsete neuroloogiliste tulemuste vahelise tugeva seose tõttu vanematel populatsioonidel ning CP- ja e2- ja e4-alleelide vahelise eeldatava seose tõttu lastel pärast varasemate seisundite mitmekesisust viisime läbi kohordi uuringu APOE genotüüpide ja APOE genotüüpide vahelise seose hindamiseks. vastsündinu HIE-le ellujäänute neuroloogiline ja neurodevelopmental staatus vanuses 18–22 kuud. Me püstitasime hüpoteesi, et 18 kuni 22-kuulise HIE-ga ellujäänute hulgas oleks puude levimus madalaim e3 / e3 genotüübiga inimeste seas ja suurem imikute puhul, kes kannavad APOE e2 või APOE e4 alleeli. Lisasime ka APOE e3 / e3 homosügootide ning e2 ja e4 alleelide kandjate CP sekundaarse seose analüüsi. Kuna jahutamine mõjutab pärast HIE-d tulemusi, viisime läbi ka uurimusliku analüüsi, et hinnata, kas jahutamine mõjutas APOE genotüübi ja tulemuse vahelisi seoseid.

Tulemused

Selles geeniliidu kandidaadiuuringus osales 147 isikut, kes osalesid Eunice Kennedy Shriveri Riikliku Laste Tervise ja Inimarengu Instituudi vastsündinute uurimisvõrgustiku (edaspidi “Võrk”) vastsündinute HIE hüpotermia randomiseeritud uuringus või võrgu amplituudiga integreeritud elektroentsefalograafia uuringus. (aEEG) vastsündinu HIE-ga imikutel (20, 21). Joonisel on kujutatud imikute arv, kes (i) osalesid kahe peamise uuringu kandidaatgeeni uuringus, (ii) ei saanud järelkontrolli ja (iii) surid enne 18–22-kuuse tulemuse kindlakstegemist. 1 Kaheksa (5, 4%) imikut suri enne väljutamist - kuus esimese 4 sünnitusjärgse päeva jooksul, üks 8-päevaselt ja teine ​​19-päevaselt - ning neid ei kaasatud assotsiatsioonianalüüsidesse. Sada kolmkümmend üheksa ellujäänut oli saanud DNA proovid. Kümnel (7, 2%) imikul ei olnud esmase tulemuse määratlemiseks täielikku teavet. Lõppkokkuvõttes oli sajal kahekümne üheksal imikul DNA edukas ekstraheerimine, nad viidi läbi APOE genotüpiseerimine ja nad jäid ellu, et neil oleks esmase tulemuse kindlaksmääramiseks piisavalt teavet järelkontrollide ajal 18–22 kuud.

Image

Apolipoproteiini E (APOE) kandidaadigeeni uuringusse kaasatud imikute arv kahest esmasest Eunice Kennedy Shriveri Riikliku Laste Tervise ja Inimarengu Instituudi vastsündinute teadusvõrgustiku uuringust. Jälgimist määratletakse kui peamise tulemuse (mõõdukas või raske puue) saavutamata jätmine ellujäänute seas. Üks imik oli kadunud, kuid talle määrati kohtuotsus esmaseks tulemuseks; muude järelkontrolli tulemuste jaoks puuduvad andmed. a Amplituudiga integreeritud elektroentsefalograafia (aEEG) imikute hulgas jälgiti 47 imikut, kuid me saime esmase tulemuse määrata ainult 46-le neist (ühel oli Bayley uuring, kuid puudus tserebraalparalüüs ja kuulmisandmed). b Kümnel imikul ei olnud esmase tulemuse kindlaksmääramiseks piisavalt teavet. RCT, randomiseeritud kontrollitud uuring.

Täissuuruses pilt

  • Laadige alla PowerPointi slaid

APOE uuringukoor näis esindavat võrgustiku hüpotermia- ja aEEG-uuringutesse kaasatud imikuid, kes jäid ellu nii verejooksu kui ka järelkontrolli jaoks. APOE uuringus ellujäänutest, kelle genotüüp oli edukas, sealhulgas 10-st, kellel puudus piisav teave esmase tulemuse määratlemiseks, ei erinenud rass / etniline päritolu ega sünnitusjärgsed tüsistused võrreldes aEEG ja hüpotermia uuringutest ellujäänutega, kes ei olnud uuringusse kaasatud. APOE genotüübi uuring. APOE ning mittegenotüüpse hüpotermia ja aEEG uuringupopulatsioonide hulgas olid hästi esindatud imikud, keda klassifitseeriti Aafrika-Ameerika, Kaukaasia ja Hispaanlaste rühmadesse ( tabel 1 ). APOE uuringu kohordi imikutel olid Apgari hinded kõrgemad 10 minutiga ja rohkem neist jahutati võrreldes kahe võrgu uuringu imikutega, kes ei olnud kaasatud APOE uuringusse ( tabelis 1 on nimetatud „muud ellujäänud”); siiski ei esinenud kahes rühmas erinevust mõõduka (81 vs 80%) või raske (19 vs 20%) entsefalopaatiaga imikute protsendis ( tabel 1 ).

Täissuuruses tabel

Genotüüpi sagedused

139 imikust, kes elasid välja tühjaks ja kelle APOE genotüübid olid kindlaks tehtud, kandis 10% e2 ja 29% e4 alleeli. Lisaks oli 62% -l APOE e3 / e3 genotüüp. Ellujäänud Aafrika-Ameerika väikelastel oli e4 alleeli esinemissagedus kõrgem ja e3 / e3 genotüübi levimus madalam kui kasukaasia või hispaanlastel ( tabel 2 ).

Täissuuruses tabel

Tulemuste levimus iga genotüübi osas

Kakskümmend kuus protsenti APOE uuringus osalenud väikelastest, kes jäid ellu tühjaks, oli esmane tulemus, nimelt mõõdukas või raske puue. Ainult kahel imikul oli mõõdukas puue ja ülejäänud imikud olid raske puudega. Mõõduka või raske puude esinemissagedus APOE e3 / e3 genotüübiga imikute hulgas ei erinenud oluliselt nendest, kellel seda hüpoteesitud kaitsvat genotüüpi ei esinenud, samuti ei erinenud esmase tulemuse levimus nende hulgas, kellel oli hüpoteesitud riskialleelid e4 või e2 ja ilma nendeta ( Joonis 2 ). Lisaks ei leitud erinevusi, kui viidi läbi eraldi analüüsid erinevat rassi kuuluvate, mõõduka või raske esialgse entsefalopaatiaga imikute või jahutatud või jahutamata imikute jaoks.

Image

Mõõduka / raske puude esinemissagedus erineva genotüübiga imikutel. Iga genotüübi korral tähistavad valged ribad keskmise või raske puudega ellujäänud genotüübi protsendimäära ja mustad tulbad tähistavad protsenti ilma genotüübi säilimiseta keskmise kuni raske puudega. Apolipoproteiini E (APOE) e3 / e3 genotüübi ja järelkontrolliga 81 imiku hulgas oli esmase tulemuse levimus 30% ja 48 imiku seas, kes ei olnud e3 / e3 suhtes homosügootsed, levimus 19% ( P = 0, 21). APOE e2 alleeliga 12 imiku hulgas oli esmase tulemuse esinemissagedus 25%, võrreldes e2 alleelita 117 imiku seas 26% -ga ( P = 1, 00). Nende seas, kellel oli APOE e4 alleel ( n = 38), oli esmase tulemuse levimus 18%, võrreldes 29% -ga 91-st ilma e4-alleelita ( P = 0, 27).

Täissuuruses pilt

  • Laadige alla PowerPointi slaid

Sarnaselt esmase tulemusega märgitule ei erinenud Bayley II vaimse arengu indeksi (MDI) <70 levimus rühmades (i) APOE e3 / e3 genotüübiga ja ilma või (ii) e4-ga ja ilma selleta või e2 alleel ( joonis 3 ). Mõõduka või raske CP esinemissagedus ei erinenud oluliselt e3 / e3 genotüübiga ja ilma e4 / e3 alleeliga imikute vahel ning e4 või e2 alleeliga ja ilma nendeta ( joonis 4 ).

Image

Vaimse arengu indeksi (MDI) levimus <70 erineva genotüübiga imikute seas. Iga genotüübi korral tähistavad valged ribad nende protsendimäära, kelle genotüüp on MDI <70, ja mustad tulbad tähistavad protsenti, ilma et genotüüp püsiks MDI <70 korral. Apolipoproteiin E (APOE) e3 / e3 genotüübi ja jälgimisega 79 imiku hulgas oli MDI esinemissagedus <70% 28% ja 49 imiku seas, kes polnud e3 suhtes homosügootsed, levimus 16% ( P = 0, 20). APOE e2 alleeliga 13 imiku hulgas oli esmase tulemuse esinemissagedus 15%, e2 alleelita 115 imiku hulgas ( P = 0, 73) 24%. Nende seas, kellel oli APOE e4 alleel ( n = 38), oli esmase tulemuse esinemissagedus 16%, võrreldes 90% -ga 27% -l, kellel ei olnud e4 alleeli ( P = 0, 25).

Täissuuruses pilt

  • Laadige alla PowerPointi slaid
Image

Mõõduka kuni raske ajuhalvatuse (CP) levimus erineva genotüübiga imikute hulgas. Iga genotüübi korral tähistavad valged tulbad mõõduka kuni raske CP-ga ellujäänud genotüübi protsentuaalset osa ja mustad tulbad tähistavad protsenti ilma genotüübi säilimiseta mõõduka kuni raske CP-ga. Apolipoproteiini E (APOE) e3 / e3 genotüübi ja jälgimisega 80 imiku hulgas oli mõõduka kuni raskekujulise CP esinemissagedus 14% ja 48 imiku seas, kes ei olnud APOE e3 suhtes homosügootsed, levimus 13% ( P = 1, 00). APOE e2 alleeliga 12 imiku hulgas oli mõõduka kuni raskekujulise CP esinemissagedus 17%, võrreldes 116% -ga e2 alleelita imiku hulgas 13% ( P = 0, 66). APOE e4 alleeliga patsientide seas ( n = 38) oli mõõduka kuni raske CP esinemissagedus 11%, võrreldes 90% -ga 14% -l, kellel ei olnud e4 alleeli ( P = 0, 78).

Täissuuruses pilt

  • Laadige alla PowerPointi slaid

Arutelu

See aruanne on esimene, kus testiti APOE genotüüpide ja neuroloogiliste tulemuste seoseid kohordis, mis piirdus termiliste imikutega, kes jäid ellu pärast vastsündinu HIE-d. Varasemad laste juhtumite kontroll-uuringud, mis teatasid APOE genotüüpide ja CP seosest, mis on üldine tulemus pärast HIE-d, ei olnud suunatud ainult vastsündinute hüpoksilis-isheemilise kahjustusega imikute hindamisele (13, 14). Meie tulemused ei näita APOE genotüübi ja mõõduka või raske puude vahel seoseid ega konkreetselt seoseid CP-ga selles piiravamas vigastuste fenotüübis, samuti hüpotermia kasutamise muutusi.

Geneetiline epidemioloogia toetab tugevalt seoseid e4 alleeli ja Alzheimeri tõve vahel ning pärast neuroloogilisi vigastusi halva prognoosi vahel. Seos e4 alleeli ja Alzheimeri tõve vahel leiti traditsiooniliste sidemete analüüsi ja perekonnauuringute abil (10). Seos ilmneb ka siis, kui erapooletute lähenemisviiside abil katsetati e4 alleeli miljonite kogu nukleotiidi polümorfismide seas kogu genoomis seoses Alzheimeri tõvega ( P = 2, 52 × 10–53 ) (22).

Ehkki APOE genotüübi ja Alzheimeri tõve vahelisi seoseid toetav geneetiline epidemioloogia on tugev, pole APOE e4 alleeli ja CP vahelise seose testid olnud nii järjepidevad. Kahes hiljutises raportis (23, 24) CP-ga isikutest ei leitud seose tugevusi, mis leiti kahes varasemas CP ja APOE genotüübi vahelise seose kohta (13, 14). Wu jt . (23) Kaiser Permanente tervishoiusüsteemi mitmekesise, üldpopulatsioonis 334 333 vastsündinud lapse, sealhulgas tervete ja haigete imikute, assotsieerumisuuringute tulemused, mis hõlmasid üksikute nukleotiidide polümorfismide ja CP-d. Sellest kohordist võrreldi 138 erinevat tüüpi CP-d ja 165 kontrolli. APOE e4 / e3 heterosügoote seostati CP-ga, võrreldes e3 / e3 homosügootidega (koefitsientide suhe: 1, 7 (95% usaldusvahemik: 1, 01–2, 9)). Teises, hiljutises Austraalia juhtumikontrolli uuringus lastega, kes olid vanemad kui 5 aastat vanuses CP-ga, 55-st diflegiaga lapsest, võrreldes 281 kontrollrühmaga, oli koefitsientide koefitsientide suhe 1, 87 (95% usaldusvahemik: 1, 03–3, 40) e4 / e3 võrreldes e3 / e3 genotüüpidega; neljastriplegiaga laste ( n = 40) ja kontrollrühmadega ( n = 249) võrreldes oli e2 / e3 heterosügootide CP koefitsientide suhe e3 / e3 homosügootidega võrreldes 0, 23 (95% usaldusvahemik: 0, 05–1, 00) (24). . Mõlema uuringu autorid jõudsid järeldusele, et mitmekordsete võrdluste tõttu kümne kandidaadi ühe nukleotiidi polümorfismiga ei saa kumbki väita, et seosed APOE genotüübiga olid olulised; siiski olid mõlemad ettevaatlikud, et välistada geneetiliste seoste võimalus koos KT riskiga, viidates vigastuse tüübi või riskifenotüübi variatsioonide võimaliku mõju olulisusele ning ka CP fenotüübi tulemuste varieerumise olulisusele nende analüüsides (23, 24). Kolmandas uuringus, mis hõlmas ka mitme potentsiaalse etioloogiaga mitmekordse CP fenotüübiga laste rühma, ei leitud seoseid APOE genotüüpide ja CP raskuse vahel, ehkki aktiivse epilepsia esinemissagedus oli suurem e4 alleeliga laste seas (25).

APOE genotüüpide ja Alzheimeri tõve seoste mehhanismid ning vanemate elanikkonna traumade ja insuldi halbade tulemuste seos pole lõplikult teada. Alzheimeri tõve osas on juhtiv hüpotees, et erinevate genotüüpide põhjustatud valguvariatsioonid põhjustavad APOE erinevat mõju aju amüloid-akumuleerumisele ja selle veresoonkonnale (9). Pärast insulti või traumat halva tulemusega ühenduste puhul on vähem kindlust (26). Erinevate isheemiliste ja traumaatiliste ajukahjustuste loomkatsetes e4 alleeliga seotud postuleeritud mehhanismide hulka kuuluvad paranemiseks ja sellele järgnevaks sünaptogeneesiks oluliste lipiidide vähemtõhus transportimine (27), halvem kaitse oksüdatiivsete vigastuste vastu (28) ja suurem aju põletik ( 29, 30). Kuna oksüdatiivne vigastus, järgneva ühenduvuse häired ja põletikulised kahjustused on kõik hüpoksilis-isheemilise vigastusejärgsete tagajärgede halva mõju põhjustajad (4), tekitab e4 alleeli seos nende mehhanismidega kahtlust, et see võib samamoodi olla seotud ka halvemate tulemustega pärast HIE-d. Meie tulemused väheses vastsündinute kohordis, kes pärast vastsündinute HIE-d üle elavad ja kellel on selgelt määratletud fenotüübid, ei toeta seda hüpoteesi.

Mõõduka kuni raske puude esinemissagedus meie väikeses uuringugrupis oli e4-alleeliga patsientide hulgas 18% ja e4-alleelita patsientide hulgas 29%. See erinevus polnud märkimisväärne. Mõneti võib spekuleerida, et e4 alleeli võib seostada eelistega nooremates populatsioonides. Uuringus, milles hinnati seost e4 alleeli olemasolu ja CP raskuse vahel CP-ga laste seas (61% enneaegselt sündinud), ilmnes suundumus, mille kohaselt ühe e4 alleeliga imikud olid tõenäolisemalt madala raskuse rühm (31). Mehhiko ja Brasiilia vaestes piirkondades sündinud ja kasvanud laste seas on e4 alleeli seostatud parema 2-aastase ja hilisema tulemusega (6, 32). Kui APOE variandid on varem tõepoolest kaitsvad, kuid aitavad kaasa Alzheimeri tõve tekkele hilisemas elus, võib geen järgida antagonistliku pleiotroopia põhimõtet, nii et hoolimata potentsiaalselt kahjulikest mõjudest hilisemas elus, võivad teatud polümorfismid olla kasulikud kriitilistel arenguperioodidel, kui nad kokku puutuvad. keskkonnastressiga (6, 26). Märkimist väärib see, et e4 alleeli populatsiooni levimus meie rassiliselt segatud uuringupopulatsioonis (29%) on kõrgem kui mitmest piirkonnast ja etnilisest kuuluvusest pärit täiskasvanud kohordi rühmas (2–40%) (33, 34). Tõendid osutavad APOE-le kui sünaptogeneesi kriitilisele gliaalsele tegurile, mis võib hiljem mõjutada ka pikaajalist sünaptilist plastilisust (35). Wright jt . (6) postuleerib, et kui e4 soodustab müeliniseerumist, sünaptogeneesi või muid neuroarenguga seotud rasvhapete / kolesterooli vahendatud protsesse, siis võivad tema uuringu kohordi laste seas täheldatud kõrgemad Bayley skoorid olla tingitud kaitsest neurotoksiinide kahjulike mõjude eest need protsessid on seotud mehhanismiga, mis on seotud APOE geenist e4 alleeliga toodetud peptiidi seni tundmatute funktsionaalsete erinevustega. Soolestiku tervisega seotud hüpotees on esile kerkinud ka Brasiilia vaesemate laste uuringus, mille keskmised vanusepikkuse korral z- skoorid on täiendatud retinooli ja tsingi või mõlemaga, millele on lisatud glutamiinilisandit. Soolestiku barjääri funktsiooni ja kognitiivse tulemuse mõõtmisel näitasid e4 alleeli puudutavad lapsed Pearsoni suhtes negatiivseid korrelatsioone laktuloosi ja mannitooli suhte muutuse üle 4 kuu jooksul ning verbaalse õppimise ja mitteverbaalse intelligentsuse vahel, sõltumata nende kolmest sekkumisest. Autorid spekuleerivad, et APOE genotüübi ja soolestiku troofiliste tegurite vahel on interaktsioon, mis tähendab paremat toitumis- ja lõppkokkuvõttes neurokognitiivset tulemust (36). Selle leiu kontrollimiseks on vaja suuremate imikute kohortide kogunemist HIE-ga ja olemasolevaid geneetilisi proove ning täpseid neuroloogiliste ja neurodepressiooni tulemuste fenotüüpe.

Oleme kasutanud oma uuringupopulatsiooni, et saada võimalikult täpne hinnang APOE genotüüpide ja alleelide vaheliste seoste ja tulemuste kohta HIEga nakatunud imikutele. Ehkki meie uuring on ainulaadne selle poolest, et see hõlmas ainult HIE-ga imikuid, võimaldas väike uuringupopulatsioon ainult piiratud arvu seostamisuuringuid ja sellel on piiratud statistiline võime oluliste mõjude tuvastamiseks (37, 38). Ehkki hinnang võib olla täpne, tuleks meie järeldusi tõlgendada ettevaatlikult. 90% võimsusega olulisuse tõendamiseks oleks vaja kaks kuni kolm korda suuremat uuringupopulatsiooni, mille alleelide sagedus ja tulemuste levimus oleksid sarnased proportsioonides juhtumite ja kontrollide vahel (39). Lisaks ei saa alahinnata nii vigastuse täpsuse kui ka tulemuse fenotüübi olulisust geneetilise seose uurimisel. Isegi kui me usume, et vastsündinu entsefalopaatial põhinevad kõlblikkuskriteeriumid on meie uuringu tugevus, esines mõnel uuringugrupi imikul ägedaid sentinüülisündmusi, mis olid kooskõlas äkilise ägeda hüpoksilise-isheemilise vigastusega nagu nabanööri prolapss või emaka rebend, samas kui teistel oli entsefalopaatia sündides ilma perinataalsete kontrollsündmusteta või mitmete sünnitusjärgsete tüsistustega (20). Meie uuring hõlmab ka ainult ellujäänud imikuid. Meie selle põhjendus on osaliselt praktiline, kuna me ei küsinud nõusolekut proovide kogumiseks teadusuuringute DNA analüüsiks haiglaravi ägedatel esimestel päevadel ja nädalatel ning kuna keskendume APOE geneetilisele variatsioonile, mis mängib rolli taastumisel mõõdukast kuni raske vigastus. Märkimisväärseid erinevusi võis leida suuremas patsientide rühmas ja kui proovid koguti sündides, oleks võinud analüüsidesse kaasata kõik surnud imikud, kellest paljudel oli raske entsefalopaatia. APOE võib olla rohkem seotud vastuvõtlikkusega esialgsetele vigastustele, mitte selle esialgsest vigastusest taastumise ja esialgse paranemisega.

Ehkki meie uurimuslik uuring ei tuvastanud olulisi seoseid APOE genotüüpide ja HIE järgselt saadud tulemuste vahel, pakub huvi e4 alleeliga väikelaste CP ja MDI <70 esinemissagedus, mis nõuab testimist palju suuremates kohortides nii täpse esmase vastsündinu HIE kui ka neuroloogiliste ja arenguhäirete fenotüüpide järelkontroll.

Järeldus

Selles väikeses vastsündinu HIE-ga ellujäänud imikute kohordis polnud mingeid tõendeid APOE e3 / e3 genotüübi seostumise paranenud neurodepressiivse tulemusega 18–22 kuud või seost APOE e2 või e4 alleeli olemasolu ja suurenenud vahel neurodepulatiivse puude risk. Nende tulemuste kinnitamiseks ja muude võimalike geneetiliste tegurite uurimiseks, mis võivad mõjutada tulemust pärast vastsündinu HIE-d, on vaja täiendavaid uuringuid.

Meetodid

Eunice Kennedy Shriveri Riikliku Laste Tervise ja Inimarengu Instituudi vastsündinute teadusuuringute võrgustiku terapeutilise hüpotermia uuringusse (20) ja aEEG kasulikkuse uuringusse HIE-ga imikute tulemuste prognoosimisel osalenud üleelanud keskmise raskusega või raske HIEga imikud 21). Nende uuringute kõlblikkuskriteeriumid hõlmasid raseduse vanust vähemalt 36 nädalat ja sünnikaal üle 1800 g. Vastsündinu HIE määratleti hüpotermia ja aEEG uuringutes kirjeldatud viisil. Abikõlblikkuskriteeriumide hulka kuulus nabaväädiveres või veregaasis pH 7, 0 või vähem või aluse defitsiit 16 mmol / l või rohkem esimese tunni jooksul pärast sündi. Kui selle ajavahemiku jooksul oli pH vahemikus 7, 01–7, 15, aluse defitsiit vahemikus 10–15, 9 mmol / l või veregaasi näit puudus, oli vaja täiendavaid kriteeriume. Need hõlmasid ägeda perinataalse sündmuse anamneesi (nt hiline või muutuv aeglustus, nabaväädi prolapss, nabanööri rebend, emaka rebend, ematrauma, hemorraagia või kardiorespiratoorne seiskumine) ja 10-minutise Apgari hindega 5 või vähem või sünnituse ajal käivitatud abistav ventilatsioon, mida jätkati vähemalt 10 minutit. Kui need kriteeriumid olid täidetud, tehti kõikidele imikutele standardiseeritud neuroloogiline uuring, mille teostas sertifitseeritud eksamineerija. Imikud olid uuringu kandidaadid mõõduka või raske entsefalopaatia või krambihoogude korral (20, 21). Tulemusi 18–22 kuu vanuselt hinnati standardsel neuroloogilisel uuringul ja sertifitseeritud eksamineerijad rakendasid imiku arengu II järgu Bayley skaalasid (20, 21). Hüpotermia uuringus ja selles uuringus defineeriti rasket puudeid kui ühte järgmistest: MDI <70, motoorsete funktsioonide brutosüsteemi klassifikatsioonisüsteem 3–5 (vastab mõõdukale / raskele CP-le), abivajavaid kuulmispuudeid või kahepoolset pimedust. . Mõõduka puude all mõisteti Bayley II MDI 70–84, millele lisandub üks järgmistest: motoorsete funktsioonide brutoklasside klassifikatsioonisüsteem 2, kuulmispuue ilma abivahenditeta või krambihäired, mis vajavad krambivastaseid aineid. Assotsiatsioonianalüüside esmane tulemus oli kas mõõdukas või raske puue (20, 21).

DNA kogumiseks ja analüüsimiseks kasutati DNA kogumiseks enne haiglaravi või järelkontrolli bukaalset tampooni. APOE genotüübid määrati restriktsioonifragmendi pikkuse polümorfismi mõõtmise abil. DNA ekstraheerimine ja APOE genotüpiseerimine viidi läbi Duke'i ülikoolis (Durham, NC). DNA ekstraheeriti suuõõne tampoonidest ja amplifitseeriti kõigepealt oligonukleotiidpraimerite F4 (5′-ACAGAATTCGCCCCGGCCTGGTACAC-3 ') ja F6 (5'-TAAGCTTGGCACGGCTGTCCAAGGA-3') abil. APOE amplifitseerimisproduktid lagundati seejärel restriktsiooniensüümiga HhaI, nagu on kirjeldanud Hixson ja Vernier (40).

Kuna mitte igale perekonnale, kelle imik oli kaasatud võrgu hüpotermia või aEEG-uuringutesse, ei pöördutud APOE genotüübi uuringu nõusoleku saamiseks hüpotermia või aEEG-uuringu algatamise hetkest alates, võrdlesime demograafilisi ja perinataalseid karakteristikuid ning sündmusi genotüpiseerimises osalenute vahel õppima ja neid, kes polnud. Kahe rühma võrdlemiseks kasutasime kategoorilisi muutujaid t 2 ja t- teste.

Esmaste analüüside jaoks võrdlesime esmase tulemuse - mõõduka või raske puude - levimust imikute puhul, kellel oli APOE e3 / e3 genotüüp ja ilma, e2 või e4 alleeliga või ilma selleta Fisheri täpse testi abil. Võrdlesime ka esmaste tulemuste komponentide - MDI <70 ja mõõduka / raske CP (üldine motoorse funktsiooni klassifikatsioonisüsteem 3–5) - ülekaalus imikuid (i) APOE e3 / e3 genotüübiga ja ilma ja (ii) ja ilma e2 või e4 alleelita. Eraldi uurimusanalüüsis võrdlesime tulemuste levimust e3 / e3 genotüübi või alleelita või alleelivabade või alleelivabade imikutega erineva rassiga imikute hulgas, et arvestada rasside võimalike alleelide sageduse erinevusi, ii) erineva raskusastmega imikutega entsefalopaatia registreerimisel ja (iii) jahutatud imikute ja jahutamata imikute hulgas.

Saadi informeeritud nõusolek ja uuringu kiitsid heaks kõigi saitide institutsionaalsed ülevaatusnõukogud (alade loetelu on veebis lisatud lisas ), sealhulgas andmete koordineerimise keskus RTI International (Research Triangle Park, NC). Kuna geneetiline teave loodi, hankis andmeid koordineeriv keskus selle uuringu jaoks konfidentsiaalsuse sertifikaadi.

Finantstoetuse avaldus

Seda uuringut rahastas Riiklik laste tervise ja inimarengu instituut (NICHD) vastsündinute uurimisvõrgustik (NRN). Uurijad ja teadusuuringute koordinaatorid said palgatoetust iga saidi võrgutoetuste osana. Toetuste numbrid on eraldi loetletud lisa lisas . Ühelgi autoril pole uurimisel kasutatavate toodetega seotud rahalisi sidemeid ega potentsiaalseid / tajutavaid huvide konflikte, mida avalikustada.

Täiendav teave

Wordi dokumendid

  1. 1

    Täiendav lisa